GMP-gecertificeerd Tirzepatide Retratrutide Cagrilintide 10 mg 15 mg 20 mg 30 mg vial gelyofiliseerd Poeder

• CAS No.: 2023788-19-2
• Formula: C225h348n48o
• EINECS: 2023788-19-2
• Type: API
• Appearance: Powder
• Quality: Pharma Grade
• Model NR.: 45051519
• Colour: White
• Peptide Purity: >99.4% HPLC
• moleculaire formule: C225h348n48o
• moleculaire massa: 4813.45
• bacteriële endotoxinen: < 10 EU/Mg
• Total Aerobic Microbial Count: < 10 Cfu/G
• Total Combined Yeasts and Moulds Count: < 10 Cfu/G
• opslagomstandigheden: 2c - 8c, Well-Closed Containers
• Transportpakket: Vials/Tray/Tube
• Specificatie: 5mg, 10mg, 15mg, 20mg, 30mg, 1g
• Handelsmerk: Tirzepatide
• Oorsprong: China
• Productiecapaciteit: 1-5kgs Per Month

Beschrijving

Belangrijkste producten

 

Productnr.	Product
4109711	Bacteriostatisch water 10 ml.
4109712	Bacteriostatisch water 30 ml.
4109713	Semaglutide 5 mg
4109714	Semaglutide 10 mg
4109715	Semaglutide 15 mg
4109716	Semaglutide 20 mg
4109717	Semaglutide + VitB12
4109718	Caagrilintide 5 mg
4109719	Caagrilintide 10 mg
4109720	CagriSema 10 mg (5 mg + 5 mg)
4109721	Tirzepatide 5 mg
4109722	Tirzepatide 10 mg
4109723	Tirzepatide 15 mg
4109724	Tirzepatide 20 mg
4109725	Tirzepatide 30 mg
4109726	Tirzepatide + Pyridoxine
4109727	Retatrotide 10 mg
4109728	Retatrotide 12 mg
4109729	Retatrotide 15 mg
4109730	NAD+ 500 mg
4109731	NAD+ 1000 mg
4109732	Semaglutide cartridges 5 mg
4109733	Semaglutide cartridges 10 mg
4109734	Tirzepatide cartridges 10 mg
4109735	LLY HumaPen Luxura pen-injector
4109736	LLY HumaPen Ergo II pen-injector
4109737	Adipotide (FTPP) 10 mg
4109739	AOD 5 mg
4109740	AOD 10 mg
4109741	ARA-290 16 mg
4109742	B7-33 6 mg
4109743	BPC 5 mg
4109744	BPC 10 mg
4109745	CJC DAC 2 mg
4109746	CJC DAC 5 mg
4109747	CJC 5 mg
4109748	DSIP 5 mg
4109749	Epitalon 10 mg
4109750	Epitalon 20 mg
4109751	F-344 1 mg
4109752	FOXO4-DRI 10 mg
4109753	GHK-Cu (Copper Peptide) 50 mg
4109754	GP-6 10 mg
4109755	Glutathione 600 mg
4109756	Gonado 10 mg
4109757	Humanin 10 mg
4109758	LR3 1 mg
4109759	Ipamo 5 mg
4109760	Ipamo 10 mg
4109761	Kisseptin-10 5 mg
4109762	KPV 5 mg
4109763	KPV 10 mg
4109764	LL-37 (CAP-18) 5 mg
4109765	Melanotan 2 10 mg
4109766	MOTS-c 10 mg (acetaat, TFA verwijderd)
4109767	N-Acetyl-epitalon-amidaet 20 mg
4109768	Oxy 10 mg
4109769	PNC-27 5 mg
4109770	P141 10 mg
4109771	P21 (P021) 5 mg
4109772	Selank 10 mg
4109773	Semax 10 mg
4109774	Sermo 5 mg
4109775	Sermo 10 mg
4109776	SS-31 (Elamipetide) 50 mg
4109777	Tesamo 2 mg
4109778	Tesamo 10 mg
4109779	Thymaline 20 mg
4109780	TA-1 5 mg
4109781	TA-1 10 mg
4109782	TB-4 5 mg
4109783	TB-4 10 mg
4109784	BP TB-blend 5 mg/5 mg
4109785	BP TB-blend 10 mg/10 mg
4109786	CJC IPA-mengsel 5 mg/5 mg
4109787	CJC IPA-blend 5 mg/10 mg
4109788	Sermo, Ipamo Blend 5 mg/5 mg
4109789	Tesamo, Ipamo Blend 5 mg/5 mg
4109790	Tesamo, Ipamo Blend 6 mg/2 mg

Diensten

CGMP peptides productie

Zhaobo Bio verwierf vroege beheersing van de ontwikkeling en de productie van peptiden, de korte keten aminozuren verbonden door peptide bindingen die nieuwe generaties van kleine molecule drugs die dicht de natuurlijke wegen van het lichaam nabootsen.
Nu beschikt Zhaobo Bio over eersteklas capaciteiten om peptiden op industriële schaal te produceren en volledig in overeenstemming met de strengste normen voor Good Manufacturing Practice (cGMP).

Upstream peptide-synthese
Zhaobo Bio-productiebedrijven zijn uitgerust met geavanceerde apparatuur voor de levering van oplosmiddelen, peptide-synthese, zuivering en isolatie van actieve ingrediënten en tussenproducten. Alle apparatuur en containment zijn GMP-gekwalificeerd en goedgekeurd voor reiniging. Overlappende capaciteiten en afmetingen van verschillende uitrustingstreinen vergemakkelijken een soepele opschalen voor een grotere vraag binnen de levenscyclus van het product.  

Stroomafwaartse zuivering en isolatie van peptiden
Zhaobo Bio zet zich in voor de systematische uitbreiding en modernisering van haar zuiveringsapparatuur om de efficiënte productie van steeds grotere hoeveelheden peptide-farmaceutische producten te garanderen.
Het gebruikt geavanceerde methoden voor grootschalige zuiveringcampagnes zoals preparatieve high performance liquid chromatografie (HPLC), ionenuitwisseling (IEX), size-exclusion chromatografie (SEC) en ultra-filtratie (UF/TFF). De apparatuur die is aangebracht maakt een zeer efficiënte of zelfs continue productie van extreem zuivere producten mogelijk tot een hoeveelheid van meerdere kg per partij.
Voor preparatieve HPLC zijn roestvast stalen kolommen met een diameter van maximaal 60 cm (DAC), zowel in batch- als in continumodus, voorzien van de juiste hoogwaardige silica-scheidingsfase. Voor laagdrukchromatografiekolommen met een diameter tot 80 cm zijn verkrijgbaar. De levering van oplosmiddelen wordt gegarandeerd door de eluente tankboerderijen en containers.
De beheersing van microbiologische besmetting is een voorwaarde voor de API-productie. Cleanrooms van klasse D (ISO 8) en C (ISO 7) worden geleverd via HEPA-gefilterde, temperatuur- en vochtigheidsgecontroleerde lucht, en omlaag-flow-cabines worden gebruikt om microbiële besmetting te minimaliseren en operators te beschermen. Zeer actieve farmaceutische ingrediënten worden verwerkt in geïntegreerde veiligheidswerkbanken of flexibele isolatoren die OEB-niveau 4 (1-10 µg/m3) bereiken.
Vooraf gedefinieerde fysisch-chemische eigenschappen van de API kunnen alleen worden bereikt door een zorgvuldig gecontroleerd isolatieproces. Naast neerslag en kristallisatie is de lyophilisatie van tussenproducten en de uiteindelijke API een standaardoperatie.  LaixingPharma heeft meerdere lyophilizers in verschillende maten (tot 300 liter) in cleanrooms.

Productie van kleine moleculen

ZhaoboBio's Peptide Plant produceert en biedt ook een reeks gespecialiseerde diensten voor de cGMP kleine moleculen.
De productiecapaciteit van kleine moleculen omvat: Procesontwikkeling, chirale synthese, heterocyclische chemie, reacties met metaalkatalysatoren, hydrogenaties, oxidatie en reductie met behulp van verschillende reagentia, enzymatische reacties en hogedrukreacties.

Productbeschrijving

ANALYSECERTIFICAAT
 

Productnaam	Tirzepatide (LY3298176)
Volgorde	Tyr-{AIB}-Glu-Gly-thr-Phe-thr-Ser-ASP-Tyr-Ser-Ile-{AIB}-Leu- ASP-Lys-Ile-Ala-GLN-{diacid-gamma-Glu-(AEEA)2-Lys}-Ala-Pro-Aler-Gly-Gl-Pro-Gl-Gl-Gl-Pro-Gl-Gl-Gl-Gl-Pro-Gl-Gl-Gl-Gl-Pro-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-Gl-
Kwaliteitsstandaard	In-House	Batchnummer	ZB10023106
CAS-nr.	2023788-19-2	Batchhoeveelheid	1013,1 g
Moleculaire formule	C225H348N48O	Productiedatum	24-aug-2023
Moleculaire massa	4813.45	Datum hertesten	24-aug-2025

 

Tests		Specificaties	Resultaten
Tekens	Uiterlijk	Wit tot bijna wit los poeder	Wit los poeder
	Oplosbaarheid	Oplosbaar in water	Voldoet
Identificaties	HPLC	De retentietijd van de belangrijkste piek in het chromatogram van de testoplossing komt overeen met die in het chromatogram van de referentieoplossing, zoals verkregen in de Assay	Voldoet
	MALDI-MS	4813.5±1.0 Da	4812.6 Da
Aminozuuranalyse		SER: 4.0-6.0	4.6
		ASP: 1.6-2.4	1.6
		Thr: 1.6-2.4	1.8
		Pro: 3.2-4.8	4.1
		Tyr: 1.6-2.4	2.1
		Leu: 1.6-2.4	1.9
		Gly: 3.2-4.8	4.0
		Glu: 3.2-4.8	3.8
		Ala: 3.2-4.8	3.9
		Lys: 1.6-2.4	1.9
		Ile: 2.4-3.6	3.0
		PHE: 1.6-2.4	2.2
Pedtide purity (HPLC)		≥ 80%	93.6%
Verwante stoffen	Onzuiverheden (HPLC)	Elke niet gespecificeerde onzuiverheid  ≤ 0.10%	0.06%
		Onzuiverheden van de toal ≤ 0.50%	0.12%
Oligomer		≤ 3.0%	0.27%
Watergehalte (KF)		≤ 8.0%	4.63%
Natriumion		Rapport	1.1%
Restoplosmiddelen (GC)		Acetonitril-e ≤ 410 ppm	246 ppm
Bacteriële endotoxinen		≤ 10 EU/mg	Voldoet
Microbiologie	Totale aerobe microbiële telling	≤ 100 CFU/g	10 CFU/g
	Totaal aantal gisten en schimmels	≤ 100 CFU/g	10 CFU/g
	Escherichia coli tellen mee	Afwezig in 1 g.	Voldoet
Analyse	Berekend als C18H14F4N2O4S op gedroogde stof	98.0% - 102.0%	99.8%

 

Opslagomstandigheden:	2°C - 8°C, goed gesloten containers, beschermd tegen licht.
Opmerkingen:	Deze batch product VOLDOET aan de voorgeschreven normen.
Geanalyseerd op:	18.09.2023

COA VAN MZ-LAB

VEELGESTELDE VRAGEN

Kunt u peptiden synthetiseren met post-translationele modificaties?

Ja, we kunnen peptiden synthetiseren met een verscheidenheid aan wijzigingen, waaronder post-translationele modificaties (PTM's).  Enkele van de posttranslationele wijzigingen die we kunnen uitvoeren als onderdeel van onze peptide-productiediensten zijn:

Acetylering
Cyclische acties (inclusief disulfide bonding, nieten)
Vetacylering
Glycosylatie
Hydroxylatie
Integratie van D-Aminozuren en onnatuurlijke aminozuren
Methylering
Pegylation
Fosforylering
Vragen? Neem gerust contact met ons op of vraag vandaag nog een offerte aan voor uw komende peptide-project. LexinPharma heeft uitgebreide ervaring in het synthetiseren van peptiden die deze wijzigingen bevatten in schalen tot laat-klinische en commerciële stadia.

Maakt u peptiden als uitgangsmateriaal voor radiolabelled peptiden?

LexinPharma kan chelator-gemodificeerde peptiden produceren als uitgangsmateriaal voor radiolabelled peptiden of peptide radiotracers. Enkele voorbeelden zijn synthese van DOTA/NODAGA-gefunctionaliseerde peptiden. Deze peptiden worden dan vaak later radiolabelled met 68Ga of 177Lu en gebruikt voor tumorbeeldvorming voor diagnose en therapie of theranostics zoals peptidereceptor radionuclide therapy (PRRT).

Andere wijzigingen zijn peptiden die zijn aangepast met di-iodo-Tyr, dehydro-Leu of dehydro-Pro voor reductieve tritiatie, peptidehars voor N-terminal-capping met C14-azijnzuuranhydride, en peptiden die zijn aangepast voor de introductie van de klikchemie van radioactieve fluorine-e isotopen.

Neem contact met ons op voor meer informatie over onze mogelijkheden in peptide synthese.

Welke synthesebenadering moet worden gevolgd voor een toxicologie (tox) en fase I-batch?

Er zijn gewoonlijk 2 benaderingen voor een tox- en fase I-batch. Hier volgen een paar richtlijnen:

Twee batches:
Een tox-batch (niet-GMP met batchrecords, extra releasetests, En doelbewust een lagere zuiverheid) voor een GLP tox-onderzoek, gevolgd door een cGMP klinische batch voor een fase 1 klinische studie (die een hogere zuiverheid heeft dan de tox-batch en individuele gerelateerde substantielimieten instelt op basis van de tox-partij).

Eén batchbenadering:
Een enkele cGMP-batch die zowel voor tox als fase 1 wordt gebruikt en die identieke onzuiverheidsprofielen heeft.
Er zijn voor- en nadelen die voor elk scenario in aanmerking moeten worden genomen.

Hebt u nog vragen? Onze ervaren medewerkers helpen u graag bij het bepalen van het type strategie dat uw project nodig heeft.  

Wanneer heb ik cGMP peptiden nodig?

Een vraag die we vaak stellen is wanneer heb ik cGMP peptiden nodig? Hier is een richtlijn:

Preklinische studies: Peptide (non-GMP) van onderzoekskwaliteit is voor vrijwel alle gevallen voldoende.

Toxicologie (tox) batch: Als er geen plannen zijn voor het gebruik van de batch in fase I-studies, is materiaal van onderzoekskwaliteit (non-GMP) acceptabel, hoewel batchrecords en aanvullende introductietests worden aanbevolen. Als de tox-batch ook in latere klinische studies zal worden gebruikt, is cGMP-kwaliteit vereist. Elk scenario heeft voor- en nadelen.

Hoewel dit geen 'vereiste' is, wordt aanbevolen om materiaal met een lagere zuiverheid te gebruiken voor tox, omdat de verwante stoffen uit de tox-batch de basis zullen worden voor limieten voor verwante stoffen in volgende cGMP-batches (Limieten voor verwante stoffen die worden beperkt als gevolg van de beperkingen van een te pure tox-batch kunnen de opbrengst verlagen en de kosten van de volgende cGMP-batches doen stijgen).

Fase I en daarna: CGMP peptide is vereist.

Welke zoutvorm moet ik kiezen voor mijn peptide?

Bij het ontwikkelen van peptide moet u een zoutvorm selecteren die aanvaardbaar is voor uw toekomstige klinische studies of gewenste toepassing.

De meeste peptiden vormen zouten als ze een vrije aminogroep bevatten (die in een vrije N-terminus of op een zijketen wordt gevonden die een vrije amine heeft, bijvoorbeeld ARG, Lys en zijn).

In vroege onderzoek en ontwikkeling worden veel peptiden gebruikt als trifluoroacetaat (TFA) zout.  Dit komt doordat een TFA-zout gewoonlijk wordt gevormd door blootstelling aan een TFA/H2O-buffersysteem in omgekeerde fase HPLC-zuivering (high-performance liquid chromatography). In de vastefase peptide-synthese (SPPS) kan het peptide ook aan TFA worden blootgesteld tijdens het doorsplijten van het peptide uit de harssteun. Het TFA-zout kan in een andere zoutvorm (zoals acetaat of HCl) worden omgezet door ionenuitwisseling in een volgende stap.

Acetaatzouten zijn gewoonlijk de meest voorkomende tegenwisiekeuze en hebben de voorkeur bij latere ontwikkeling boven en HCl- en TFA-zouten. Ze worden ook gekozen omdat ze meestal resulteren in een betere lyophilizate cake, in tegenstelling tot sommige moeilijk te hanteren, "pluizige" peptiden die kunnen voortvloeien uit TFA-zouten. TFA-zout kan ook ongewenste immuunreacties veroorzaken tijdens klinische proeven, hoewel twee door de FDA goedgekeurde medicijnen op de markt zijn als TFA-zouten, bivalirudin en corticoreli-n, zonder problemen. U zou kunnen overwegen om te beginnen met een acetaatzout vorm om te voorkomen dat u later een verandering in uw productontwikkeling moet aanbrengen.

Aan de andere kant kunnen bepaalde aminozuurketens beïnvloeden welke tegenwerking beter geschikt is voor de stabiliteit van uw product. Een natriumzout (na+) is nuttig voor peptiden met zure isoelektrische punten (PI), zoals bij peptiden die meerdere ASP en Glu bevatten, evenals een C-terminaal zuur. In veel gevallen hebben peptiden met vrije sulfhydrylgroepen als HCl-zouten een betere stabiliteit tegen potentiële oxidatieonzuiverheden. Op dezelfde manier kan de keuze van de zoutvorm de oplosbaarheid van peptide beïnvloeden.  Bovendien kan zoutvorm ook een rol spelen in de secundaire structuur, waarbij sommige anionen helische structuren veroorzaken of onderdrukken en ook de fibrilvorming en stabiliteit in peptiden zoals amyloid beta-proteïne (Aß) beïnvloeden.

Zorgvuldige peptide zout vorm overweging vanaf het begin kan resulteren in een kostenbesparing later op de weg. Het team van LexinPharma is ook aanwezig om u te helpen bij het kiezen van een zoutvorm die het meest geschikt is voor uw onderzoek en ontwikkeling.

Wat betekent cGMP?

CGMP verwijst naar de huidige regels van de goede praktijk van de productie die door het beleid van het Voedsel en van de Drug van de V.S. (FDA) in het kader van het Federale Akte van het Voedsel, van de Drug, en van de Kosmetische worden afgedwongen. De voorschriften staan in 21 CFR, delen 210 en 211.

Het doel van deze regelgeving is de identiteit, kracht, kwaliteit en zuiverheid van geneesmiddelen te garanderen door te eisen dat peptide-fabrikanten de productieactiviteiten adequaat controleren. Dit omvat uitstekende kwaliteitsbeheersystemen, robuust beheer van de toeleveringsketen van peptide en risicobeperking, het verkrijgen van hoogwaardige grondstoffen, het vaststellen en valideren van operationele procedures (SOP's), het opsporen en onderzoeken van afwijkingen in de productkwaliteit en het onderhouden van gevalideerde testlaboratoria voor kwaliteitscontrole.

Welke kwaliteitscontrolegegevens verstrekt u voor peptiden die niet van GMP-kwaliteit zijn?

Kwaliteitscontrolegegevens (QC) die bij elke peptide van een andere kwaliteit dan GMP worden geleverd, omvatten massa-spectrale (MS) en HPLC-analyses die de samenstelling en zuiverheid bepalen. Aminozuuranalyse (AAA) en peptidegehalte zijn op aanvraag beschikbaar tegen extra kosten voor elke test. We bieden ook richtlijnen voor opslag en behandeling. Zie „welke gegevens worden verstrekt op het analysecertificaat (CoA)?” Voor een grondige beschrijving van alle QC-gegevens die beschikbaar zijn voor zowel niet-GMP als cGMP-peptiden.

Wat is het voordeel van het afdekken van de N- en C-termini-punten van peptide?

CGMP verwijst naar de huidige regels van de goede praktijk van de productie die door de acetylering of het afdekken van het beleid van het Voedsel en van de Drug van de V.S. (FDA) van n worden afgedwongen - het terminus zal een peptide meer als inheemse proteïne maken lijken. Het helpt ook om de afbraak van het peptide door het aminopeptidase te minimaliseren. Amidation van de C-terminus helpt ook het peptide van de afbraak van carboxypeptidase te stabiliseren.

Wat betekent cGMP?

CGMP verwijst naar de huidige regels van de goede praktijk van de productie die door het beleid van het Voedsel en van de Drug van de V.S. (FDA) in het kader van het Federale Akte van het Voedsel, van de Drug, en van de Kosmetische worden afgedwongen. De voorschriften staan in 21 CFR, delen 210 en 214.

Het doel van deze regelgeving is de identiteit, kracht, kwaliteit en zuiverheid van geneesmiddelen te garanderen door te eisen dat peptide-fabrikanten de productieactiviteiten adequaat controleren. Dit omvat uitstekende kwaliteitsbeheersystemen, robuust beheer van de toeleveringsketen van peptide en risicobeperking, het verkrijgen van hoogwaardige grondstoffen, het vaststellen en valideren van operationele procedures (SOP's), het opsporen en onderzoeken van afwijkingen in de productkwaliteit en het onderhouden van gevalideerde testlaboratoria voor kwaliteitscontrole.

Welk zuiverheidspercentage is vereist?

Het vereiste zuiverheidspercentage voor peptide is afhankelijk van uw specifieke toepassing. LexinPharma kan peptiden tot >98% purity synthetiseren. Dit zijn enkele algemene richtlijnen voor peetide-zuiverheidseisen:

Toepassing of gebruik van zuiverheidspedytide
>80% immunologische toepassingen en polyklonale antilichamenproductie
>90%* structuur-activiteit relaties (SAR) studies, bioassays
>95%* in vitro bioassays en in vivo biologische activiteitstests, pH I en vroege pH II
>98% Pharma-cGMP materiaal met een set onzuiverheden specificaties (Late PH II - pH III en commercieel)
*voor peptiden die worden gebruikt voor toxicologisch onderzoek wordt aanbevolen om specificaties voor zuiverheid aan de onderkant te hebben, misschien van 90 tot 95%.

Levert u peptiden van cGMP-kwaliteit?

De ontwikkeling en synthese van de peptide van cGMP is de kern van ons bedrijf. LexinPharma levert grootschalige cGMP peptide-diensten met een capaciteit tot 100 kilogram per project. Onze uitgebreide ervaring en capaciteit voor cGMP-grade synthese van nieuwe chemische entiteiten (NCEs) of generieke peptiden (G-Rx) is uniek in onze industrie. We werken samen van vroege preklinische studies tot klinische evaluaties en uiteindelijke commerciële productie.

Wat is de maximale peptide-lengte die u kunt synthetiseren?

We kunnen peptiden van lengten tot ~80 residuen synthetiseren. Peptidelengten van 10 tot 70 residuen kunnen gewoonlijk worden gemaakt door directe chemische synthese van de peptide-synthese (SPPS). Afhankelijk van de schaal en toekomstige eisen kunnen gecombineerde strategieën voor het gebruik van condensatie van oplossingsfragment of zelfs hybride methoden waarbij vaste-fase koppelingen van beschermde peptidefragmenten betrokken zijn, specifiek voor elk product worden ontwikkeld. We kunnen ook gebruik maken van native chemische lidatie (NCL) om langere peptiden en potentieel mini-eiwitten te maken met behulp van volledig gedebeschermde peptidefragmenten met een N-terminal Cys residu en een ander fragment dat een C-terminal thioester bevat. Hoewel we met succes peptiden >80 residu's hebben gemaakt, worden peptiden groter dan 80 aminozuren vaak viably vervaardigd via een recombinante synthese. Aan de andere kant worden peptiden met 2-10 aminozuren vaak vervaardigd door middel van oplossing of vloeibare fase peptide synthese (LPPS).  

Wat veroorzaakt vertragingen bij peptide-levering?

Peptide-productie is onvoorspelbaar omdat elke peptide-sequentie uniek is. Elk van deze twee heeft specifieke kenmerken, afhankelijk van de aanwezige residuen en de problemen die zij kunnen veroorzaken. Helaas kan dit leiden tot vertragingen in de levering, omdat we een succesvol proces moeten verfijnen en deze problemen moeten voorkomen of omzeilen, om een peptide te leveren met de kwaliteit die je verwacht. De wetenschappers van AmbioPharm hebben ervaring in vele soorten peptiden en vele verschillende peptide synthesestrategieën, maar soms kan een bepaalde sequentie nog steeds fijnafstemming en extra procesontwikkeling vereisen. Het vooraf delen van uw eerdere ervaringen met een specifiek peptide kan ons helpen syntheseproblemen of vertragingen te voorkomen. Bovendien kunnen onvoorziene vertragingen in de toeleveringsketen de levertijden beïnvloeden. We proberen reagentia aan te schaffen om dit soort vertragingen te voorkomen.

We bieden wekelijks updates aan al onze partners om hen op de hoogte te houden van onze vooruitgang en eventuele onverwachte vertragingen die we kunnen tegenkomen.

Welke methoden gebruikt u om peptiden te synthetiseren?

We gebruiken meestal Fmoc-TBU solid-phase peptide synthesis (SPPS), maar we zijn ook zeer bekwaam in de kunst van de klassieke (oplossingsfase of vloeibare fase peptide synthesis (LPPS)), en hybride synthesemethoden. Hybride synthesetechnologie maakt gebruik van volledig beschermde peptidefragmenten die zijn gekoppeld aan hars-gebonden peptidefragmenten. Voor zeer lange peptiden kunnen we zelfs overwegen om de NCL-benadering (native chemical ligation) te volgen.

Wat is de beste manier om peptiden op te lossen?

De oplosbaarheid van een gegeven peptide varieert afhankelijk van de aminozuurvolgorde en de wijzigingen. LexinPharma zuivert peptiden door RP-HPLC met een water- en acetonitril-e-gradiënt. Hier volgen enkele algemene tips voor het oplossen van peptiden:

Sonicatie verhoogt de oplosbaarheid.
10% azijnzuur in het oplosmiddel zal helpen basispeptiden (Isoelektrisch punt, PI >7) op te lossen.
10% ammoniumbicarbonaat zal zure peptiden helpen oplossen. (PI <7)
Voor zeer hydrofobe peptiden die spaarzaam oplosbaar zijn in waterige oplossingen, moeten eerst water-mengbare organische oplosmiddelen (zoals dimethylsulfoxide (DMSO), isopropano-l, methano-l en acetonitril-e) worden gebruikt. Zodra de peptiden volledig zijn opgelost, kan geleidelijk water worden toegevoegd totdat de gewenste concentratie is bereikt.

Hoe moet u peptiden opslaan?

Wij raden aan dat gelyofiliseerde peptiden op lange termijn worden opgeslagen bij -20°C. Voor peptiden die oxidatiegevoelige residu's zoals Cys, met of TRP bevatten, raden we aan om deze ook onder een inerte atmosfeer van N2 op te slaan.

Hoe wordt het theoretische netto peptidegehalte berekend?

Theoretisch netto peptidegehalte (berekend uitgaande van de veronderstelling dat tegenionen de enige niet-peptide componenten zijn die aanwezig zijn in uw peptidemonster) Kan worden geschat door het molecuulgewicht (MW) van het peptide te delen door een som van dit molecuulgewicht en een aantal tegenionen van trifluoroacetaat (TFA) of acetaat (ACO-) die nodig zijn om het peptide te neutraliseren vermenigvuldigd met het molecuulgewicht van de TFA-tegenion (MW= 114) En de ACO-tegenhanger is (MW= 59).

Een synthetische peptide met een TFA-zout en een MW= 1000 met een vrije N-terminal aminogroep en een Lys heeft een theoretisch netto peptidegehalte van 1000 / (1000 + (2 x 114)) = 1000/1228 = 0.81 of 81%. Dit voorbeeld peptide heeft 2 posities voor het TFA-zout om te binden, vandaar de 2×114.

Theoretische formule voor peptide-inhoud: (Peptide MW)/(peptide MW + (#gebonden zouten x zout MW))

Contterionen zijn niet de enige potentiële non-peptide componenten in het peptide-monster. Het kan ook restwater, adsorbeerde oplosmiddelen en sporen van andere stoffen bevatten. Als gevolg hiervan wordt het werkelijke netto peptidegehalte gewoonlijk bepaald door ofwel elementair onderzoek (N2-gehalte) ofwel kwantitatieve aminozuuranalyse.

Wat is netto peptide-inhoud?

Het is belangrijk om het verschil te begrijpen tussen het netto peptidegehalte en het totale (bruto) peptidegehalte. Het gelyofiliseerde peptidepoeder dat naar u wordt verzonden bevat gewoonlijk niet alleen peptide, maar ook enkele andere stoffen zoals water, geadsorbeerde oplosmiddelen, tegengionen en zouten. Het totale peptidegehalte verwijst naar het gewicht van dit mengsel (brutogewicht). Het netto peptidegewicht geeft alleen het werkelijke gewicht aan van de peptidecomponent van uw monster. In de meeste peptiden is het netto peptidegehalte gewoonlijk 60-90% van het totale peptidegewicht (ook wel bruto peptidegewicht genoemd) en wordt gewoonlijk bepaald door elementair onderzoek, aminozuuranalyse (AAA) of UV-spectrofotometrie. In het geval van peptiden die worden gezuiverd door reverse-fase High Performance Liquid Chromatografie (RP-HPLC), draagt de gebruikte buffer (gewoonlijk TFA/H2O) een zout bij aan alle vrije amine-groepen binnen het peptide. Zoutvormen kunnen worden uitgewisseld door ionenuitwisseling. De overgrote meerderheid van de peptide API's wordt geproduceerd als acetaatzouten.

Het netto peptidegehalte mag niet worden verward met zuiverheid. Zuiverheid definieert het percentage van de doelpeptide-sequentie in de peptide-component van uw monster. Bij concentratieberekeningen is het belangrijk om rekening te houden met peptide-inhoud.

Welke peptide-zuiveringstechnieken gebruikt u?

Theoretisch netto peptidegehalte (berekend ervan uitgaande dat de tegengionen de enige non-peptide componenten zijn die in de meeste gevallen aanwezig zijn in uw, gebruiken we preparatieve RP-HPLC voor peptide zuivering. Soms kan ook ionen-uitwisselingschromatografie (IEX) worden gebruikt. IEX is vooral nuttig in het geval van pegylated peptiden voor het verwijderen van de vrije, niet-gereageerde PEG. Bovendien kan met uitzondering van grootte (SEC) onzuiverheden en polymeren met een hoog molecuulgewicht worden verwijderd, zoals bij peptiden met meerdere disulfide.

Wat is het typische zuiverheidspercentage van aangepaste peptiden?

Bij LexinPharma wordt het zuiverheidspercentage van de op maat gemaakte peptiden bepaald door de specificatie van onze partner. Gewoonlijk kiezen veel onderzoekers voor >95% door reverse-fase High Performance Liquid Chromatografie (RP-HPLC of rHPLC). Dit betekent dat 95% van het netto PEPTIDE-gehalte (maar niet het totale peptide-gehalte, zie "wat is netto peptide-gehalte?") van het gelyofiliseerde poeder dat naar u wordt verscheept bestaat uit uw doelpeptide. De andere 5% van het PEPTIDE-materiaal in uw monster bestaat gewoonlijk uit de volgorde van verwijdering en/of toevoeging die soms meeelueren met het peptide-doelpunt. Deze deletie- en toevoegingssequenties worden gegenereerd tijdens peptide-synthese als gevolg van de inefficiëntie van het koppelen van bepaalde aminozuren (meestal β-vertakte residuen (Ile, Val en thr) of die met omvangrijke beschermgroepen (ARG, GLN, Cys en ASN) ontbreken of soms worden gedupliceerd) in sommige van de gesynthetiseerde moleculen. Zuiverheid wordt gewoonlijk bepaald door reverse-fase HPLC. We hebben de mogelijkheid om elk zuiverheidspercentage te halen dat u wenst.

Welke gegevens worden verstrekt op het certificaat van Analyse (CoA)?

Voor alle peptiden die niet van GMP-kwaliteit zijn, zal uw CoA met informatie zoals aminozuursequentie, modificaties, zuiverheid, massaspectrale gegevens en RP-HPLC-gegevens (reversed-phase high-performance liquid chromatography) worden verstrekt. Aanvullende gegevens kunnen ook worden gerapporteerd, zoals aminozuuranalyse, peptidegehalte, bioburden, endotoxine, watergehalte, tegengaan van inhoud, enz. als deze vooraf zijn aangevraagd als offertediensten naast ons standaardpakket.
Voor GMP-diensten is het CoA veel uitgebreider. Een typische CoA voor een cGMP-peptide zal de volgende gegevens en door de klant geleverde specificaties bevatten, waaronder aspect of uiterlijk, moleculair gewicht door MS, zuiverheid door RP-HPLC of UPLC, gespecificeerde onzuiverheden, niet gespecificeerde onzuiverheden, totale onzuiverheden, peptidegehalte door elementanalyse, watergehalte (Karl Fischer), tegengioningsgehalte door ionchromatografie; aminozuuranalyse, massabalans, bioburden en endotoxine resultaten. Andere diensten kunnen worden aangevraagd, zoals MS-MS sequencing, NMR, impurity synthesis en spiking studies, methodeontwikkeling en validatie, procesontwikkeling en optimalisatie, etc.

Wat is de typische doorlooptijd voor peptide-synthese die niet van GMP is?

Onze typische doorlooptijd voor custom peptide synthese is ongeveer drie tot vier weken. De doorlooptijd kan variëren afhankelijk van de lengte van het peptide en de complexiteit van de synthese. Voor cGMP-synthese zijn de levertijden aanzienlijk langer als gevolg van de QA- en QC-activiteiten die met dit werk samenhangen.