Productbeschrijving
Productnaam HiPure DNA/RNA Mini Kit
Art. Nr. en specificaties R511102,50Preps/kit
Inleiding
De kit is ontworpen om genomisch DNA en totale RNA gelijktijdig te zuiveren uit één biologisch monster. Lysate wordt eerst door een DNA-spinkolom geleid om DNA selectief te isoleren en vervolgens door een RNA -kolom om RNA selectief te isoleren. Zuiver DNA en RNA worden uit het gehele monster gezuiverd, in tegenstelling tot andere procedures waarbij ofwel het biologische monster ofwel de gezuiverde totale nucleïnezuren in tweeën worden verdeeld voordat ze afzonderlijk worden verwerkt. De kit is compatibel met kleine hoeveelheden van een breed scala aan dierlijke cellen en weefsels.
Hoofdsamenstelling
| Product |
R511102 |
| Voorbereidingstijden |
50 |
| HiPure DNA-minikolom |
50 |
| HiPure RNA Mini-kolommen |
50 |
| Opvangbuisjes van 2 ml. |
100 |
| Buffer -RLC |
50 ml. |
| Buffer DW1 |
30 ml. |
| Buffer RW1 |
50 ml. |
| Buffer RW2* |
20 ml. |
| RNase-vrij water |
10 ml. |
| Buffer AE |
10 ml. |
Opslagvoorwaarden en geldigheid
HiPure DNA/RNA Kit-onderdelen worden gegarandeerd gedurende ten minste 12 maanden vanaf de datum van aankoop, wanneer ze bij kamertemperatuur worden bewaard. Tijdens het transport kunnen zich kristallen of neerslag vormen in de buffer-RLC. Los op door de buffer op te warmen tot 37°C.
Materialen en apparatuur die door de gebruiker moeten worden geleverd
1.Dilueer buffer RW2 met 100% ethanol en bewaar deze op de kamer temperatuur
2.microcentrifuge die ten minste 12,000 × g kan bevatten
3.als RNA wordt gezuiverd van cellijnen rijk aan RNasen, raden we aan om β-mercaptoethanol (β-ME) voor gebruik toe te voegen aan buffer RLC. Voeg 10µl β-ME toe per buffer-RLC van 1 ml. Breng de stof in een afzuigkap en draag geschikte beschermende kleding. Buffer-RLC die β-ME bevat, kan tot 1 maand bij kamertemperatuur (15-25ºC) worden bewaard. U kunt ook 20µl van 2M dithiothreitol (DTT) toevoegen per buffer-RLC van 1 ml. De voorraadoplossing van 2 M DTT in water moet vers worden bereid of worden ingevroren in aliquots voor eenmalig gebruik. Buffer-RLC met DTT kan maximaal 1 maand bij kamertemperatuur worden opgeslagen.
Problemen oplossen
A:verstopte HiPure RNA-kolom
1.te veel uitgangsmateriaal: Verminder bij latere preparaten de hoeveelheid uitgangsmateriaal. Het is van essentieel belang om de juiste hoeveelheid uitgangsmateriaal te gebruiken.
2.inefficiënte verstoring en/of homogenisatie: Het onderbreken en homogeniseren van startmateriaal als RNEasy Mini Kit pagina's 18-21.
B:RNA werkt niet goed (bijv. in RT-PCR
1.zoutconcentratie in eluaat te hoog: Wijzig de wastrap door de kolom 5 minuten bij kamertemperatuur te incuberen nadat 500 ul buffer RW2 is toegevoegd, en vervolgens centriufge.
2.eluaat bevat restethanol: Zorg ervoor dat de wash-flow uit de verzamelbuis wordt afgetapt en dat de kolom vervolgens gedurende 1 minuut op >12,000 x g wordt gecentrifugeerd.
C:DNA-besmetting in downstream expeimenten
1.geen DNase-behandeling: Voer optionele DNase-destructie uit op de kolom met behulp van RNase-vrije DNase Ste op het punt dat individuele protocollen zijn.
Verpakking en verzending
Certificaat
Laboratorium
Werkplaats
Fininshed-productgebied
Gecontroleerde Leverancier 
