Leveranciers met geverifieerde zakelijke licenties
Gecontroleerde Leverancier 
[Beoogd gebruik]
Monkeypox Virus Nucleic Acid Detection Kit (Fluorescentie PCR) wordt gebruikt voor de detectie van nucleïnezuur uit het monkeypox-virus in serum en monsters van menselijke pustulaire of vesiculaire huiduitslag van individuen die worden verdacht van besmetting met het monkeypox-virus. Door specifiek de nucleïnezuurfragmenten van het monkeypox-virus te detecteren, kan het monkeypox-virus snel worden geïdentificeerd, wat geschikt is voor een snelle diagnose van verwante ziekten die worden veroorzaakt door een besmetting met het monkeypox-virus.
[Specificatie verpakking]
25 testen/doos, 50 testen/doos
| NEE | Onderdelen | 25tests/kit | 50tests/kit | Hoofdonderdelen |
| 1 | MPV-PCR-detectiemix | 950 μl/buis, 1 buis | 950 μl/buis, 2 buizen | Primers, sondes, dNTPs, PCR-buffer, enz. |
| 2 | Mengsel van MPV-enzymen | 50 μl/buis, 1 buis | 100 μl/buis, 1 buis | H-Taq, UNG |
| 3 | MPV-positief controleproduct | 500 μl/buis, 1 buis | 500 μl/buis, 1 buis | Plasmiden klonen voor Target Gen-fragmenten |
| 4 | MPV-negatief controleproduct | 500 μl/buis, 1 buis | 500 μl/buis, 1 buis | Gesteriliseerde zoutoplossing |
Opmerking:
Kits met verschillende batchnummers zijn niet uitwisselbaar.
2.Alle biologische monsters in de kit zijn gedoofd.
[Voorbeeldvereiste]
1.Type monster
Serum en menselijke pustulaire of vesiculaire huidmonsters.
Monsterafname
Serum: Gebruik een steriele spuit om 2 ml van het bloed van de proefpersonen te zuigen, het bloed in een steriele buis te injecteren, het niet meer dan 4 uur op kamertemperatuur te laten en het serum te laten scheiden, Of centrifugeer bij 4000 omw/min gedurende 5 minuten bij kamertemperatuur om het serum te scheiden en breng het over in een steriele reservecentrifugebuis van 1,5 ml monsterafname van blaasjes en pustules: Kies verse blaasjes of pustules op de huid, desinfecteer ze met jodofoor en veeg de jodoofor vervolgens af met 70% alcohol. Nadat de alcohol volledig is verdampt, gebruikt u een steriele naald om de weefselvloeistof te doorboren en eruit te persen, het wattenstaafje in de vloeistof te dompelen, het wattenstaafje snel in de 3-5 ml-bemonsteringsbuis met de bewaaroplossing te doen, het wattenstaafje bij de bovenkant te breken, draai de buisdop vast en dicht deze af voor inspectie.
3. Opslag en verzending van monsters
De verzamelde monsters moeten onmiddellijk voor onderzoek worden verzonden. Monsters moeten binnen 24 uur worden getest als ze bij 2 tot 8 ºC worden bewaard. Monsters die niet binnen 24 uur kunnen worden getest, moeten worden opgeslagen bij -70 C of lager (bij afwezigheid van een opslagtemperatuur van -70 ºC kunnen monsters gedurende 10 dagen worden opgeslagen bij -25 ºC tot -15 ºC). Het is aan te raden meerdere invriezen/ontdooien cycli te vermijden. Monsters moeten worden vervoerd in een gesloten bevroren mengbeker met ijs of in een gesloten schuimdoos met ijs.
[Testmethode]
Lees de instructies van de testkit voor gebruik.
1.Reagensbereiding (in het gebied waar de reagentia worden bereid)
1.1 Neem de onderdelen uit de doos en plaats ze op kamertemperatuur. Nadat de temperatuur op kamertemperatuur is gebracht, meng goed en centrifugeer kort voor later gebruik. Neem, afhankelijk van het aantal te testen monsters, negatieve controles en positieve controles, de overeenkomstige hoeveelheid componenten in proportie (38 μl/persoon van MPV-PCR-reactieoplossing + 2 μl/persoon van een mengsel van MPV-enzymen), en meng ze grondig om een PCR-mengsel te vormen. Liquid-1, dat na onmiddellijke centrifugering werd gebruikt.
1.2 Breng de hierboven voorbereide reagentia naar de monsterverwerkingsruimte voor gebruik.
2.Sample processing (in het sample-verwerkingsgebied)
2.1 monsterafname:
Voor monsterextractie moet een nucleïnezuurextractiekit worden gebruikt.
Negatieve controle, positieve controle en te testen monsters worden gelijktijdig verwerkt.
2.2 Voeg een monster toe
Voeg 10 μl geëxtraheerd DNA toe aan PCR-buizen in de volgende volgorde: MPV-negatieve controle, MPV-positieve controle en te testen monster. Voeg 40 μl MPV-hoofdmengsel toe aan elke well. Elke put werd afgedekt. Gecentrifugeerd bij 2000 toeren per minuut gedurende 10 seconden, en geplaatst op een fluorescerende PCR-machine.
3.PCR-versterking (in het gebied voor versterking en analyse)
Raadpleeg de instructiehandleiding van elk instrument voor de instellingen.
3.1 plaats de PCR-reageerbuizen die klaar zijn met het toevoegen van monsters in het PCR-instrument voor fluorescentie, stel testgaten in volgens de overeenkomstige volgorde van het toevoegen van monsters, stel testgaten in voor producten voor positieve kwaliteitscontrole, producten voor negatieve kwaliteitscontrole en onbekende monsters, en stel de naam van het monster in.
3.2 Totaal reactiesysteem: 25 μl
3.3 selectie van het kanaal voor fluorescentiedetectie:1) Selecteer het FAM-kanaal (Reporter: FAM, quencher: None) om de doelgenen van het monokeypox-virus te detecteren: 2) Selecteer het HEX- of VIC-kanaal (Reporter: HEX/VIC, quencher: None); 3)Stel de referentie-fluorescentie (passieve referentie) in op none (geen); stel het monstervolume in op 50.
3.4 Cyclische parameterinstelling:
Opmerking: Gebruik het kwantitatieve PCR-instrument ABI 7500 Rea-Time fluorescentie en kies „geen” bij passieve referentie en quencher.
4.resultaatanalyse
Na de reactie worden de resultaten automatisch opgeslagen en worden de basislijn en drempel van elk detectiekanaal aangepast aan de hand van de geanalyseerde beelden. Klik op „Analyse” voor analyse om alle parameters te laten voldoen aan de eisen van kwaliteitscontrole en controleer vervolgens de detectresultaten van elk onbekend monster.
Kwaliteitscontrole
Negatieve controleproducten: DE FAM-curve heeft geen CT-waarde of CT>40; en de interne standaarddetectie van het monkeypox-virus (HEX/VIC) heeft geen CT-waarde of CT>40.
Positieve controleproducten: CURVE CS35; en interne standaarddetectie van het monkeypox-virus (HEX/VIC) is positief, CT≤35.
indien bij dezelfde inspectie tegelijkertijd aan de bovenstaande twee punten wordt voldaan, wordt de tweede inspectie als ongeldig beschouwd en moet opnieuw worden geïnspecteerd.
[Positieve referentiewaarde]
Door het onderzoek van referentiewaarden werd vastgesteld dat de referentiewaarde van CT van het doelgen dat door deze kit werd gedetecteerd 40 was, en de referentiewaarde van CT van de interne standaard 40.
[Interpretatie van testresultaten]
1.FAM detectie CT waarde ≤ 40, en de interne standaard detectie is positief (CT waarde ≤ 40), gerapporteerd als monkeypox virus positief;
2.geen CT-waarde of CT-waarde > 40 bij FAM-detectie, en de interne standaardkanaaldetectie is positief (CT-waarde ≤ 40), en het rapport is negatief voor het monkeypox-virus;
3.als er geen CT-waarde of CT-waarde > 40 in de interne standaardtest is, is het testresultaat van het monster ongeldig. De oorzaak moet worden gevonden en geëlimineerd, en het monster moet opnieuw worden bemonsterd en opnieuw worden getest (als het testresultaat van de herhaalde test nog steeds ongeldig is, neem dan contact op met het bedrijf).
4.voor positieve monsters is het interne standaardresultaat van de test niet vereist; voor negatieve monsters moet de interne standaardtest positief zijn. als de interne standaardtest negatief is, is het testresultaat van het monster ongeldig. Monsters worden opnieuw bemonsterd en er worden herhaalde experimenten uitgevoerd (als de testresultaten van herhaalde experimenten nog steeds ongeldig zijn, neem dan contact op met ons bedrijf).
[Positieve referentiewaarde]
Door het onderzoek van referentiewaarden werd vastgesteld dat de referentiewaarde van CT van het doelgen dat door deze kit werd gedetecteerd 40 was, en de referentiewaarde van CT van de interne standaard 40.
[Interpretatie van testresultaten]
1.FAM detectie CT waarde ≤ 40, en de interne standaard detectie is positief (CT waarde ≤ 40), gerapporteerd als monkeypox virus positief;
2.geen CT-waarde of CT-waarde > 40 bij FAM-detectie, en de interne standaardkanaaldetectie is positief (CT-waarde ≤ 40), en het rapport is negatief voor het monkeypox-virus;
3.als er geen CT-waarde of CT-waarde > 40 in de interne standaardtest is, is het testresultaat van het monster ongeldig. De oorzaak moet worden gevonden en geëlimineerd, en het monster moet opnieuw worden bemonsterd en opnieuw worden getest (als het testresultaat van de herhaalde test nog steeds ongeldig is, neem dan contact op met het bedrijf).
4.voor positieve monsters is het interne standaardresultaat van de test niet vereist; voor negatieve monsters moet de interne standaardtest positief zijn. als de interne standaardtest negatief is, is het testresultaat van het monster ongeldig. Monsters worden opnieuw bemonsterd en er worden herhaalde experimenten uitgevoerd (als de testresultaten van herhaalde experimenten nog steeds ongeldig zijn, neem dan contact op met ons bedrijf).
Leveranciers met geverifieerde zakelijke licenties
Gecontroleerde Leverancier 
